雷納德（馬克·里朗斯 Mark Rylance 飾）是一位手藝精湛的裁縫，一場火災之后，他離開了倫敦，來到芝加哥，在這里經營著一間屬于自己的裁縫店。店里的員工除了雷納德自己外，還有一個名叫梅布爾（佐伊·達奇 Zoey Deutch 飾）的姑娘，梅布爾的父親是一個臭名昭著的惡棍，背負著父親的“盛名”，梅布爾下定決心要攢夠錢，去看一看這個骯臟黑暗的街區以外的世界。 一天深夜，黑幫大佬羅伊（西蒙·拉塞爾·比爾 Simon Russell Beale 飾）的兒子里奇（迪倫·奧布萊恩 Dylan O'Brien 飾）和他的副手弗朗西斯（強尼·弗林 Johnny Flynn 飾）闖入了店中，里奇身受重傷，在弗朗西斯的威脅之下，雷納德處理了里奇的傷口，將他從死亡線上救了回來，但與此同時，他也被卷入了這個黑幫家族的紛爭之中。
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繁華大都會紐約，光影交錯的人間樂土，相應有層出不窮的罪惡侵蝕著這片土地。小青年彼得·帕克（Christopher Daniel Barnes 配音）和唯一的親人梅嬸（Linda Gary 飾）相依為命，如許許多多美國青年一樣穿行在繁忙的鬧市街頭。可就是這個平凡無奇的大男孩，卻被一只受過輻射的蜘蛛咬中，繼而改變了命運。在此之后，彼得發現他具有種種神奇的能力，而能力的增長又促使他成為獨立于司法之外的正義戰士，以蜘蛛俠的名頭和各種各樣的惡勢力展開斗爭。在此之后，毒蝎、章魚博士、毒液、綠魔等可怕的對手交替登場，正邪雙方在紐約各個角落展開接二連三的較量。在此期間，彼得還必須兼顧他英雄的另一面，小心平衡著和女友瑪麗以及工作之間的關系。 蜘蛛俠的故事就在一片朝氣蓬勃中漸次上演……